Produzione di proteine e Anticorpi
Responsabile: Maria Luisa Nolli
Personale (qualifica):
Personale (qualifica):
Alessandra Fucci (PhD,responsabile laboratorio)
Egildo Luca D’Andrea (PhD,biologo molecolare)
Simona Giacobbe (PhD,biochimico)
Assunta Riccio (PhD,biologo cellulare)
Aree di ricerca
Il laboratorio PF ha una consolidata esperienza in design, produzione, purificazione e caratterizzazione di proteine ricombinanti ed anticorpi monoclonali. Le attività del laboratorio includono anche lo sviluppo di saggi immunologici (ELISA) ed enzimatici, la messa a punto di protocolli di tech-transfer per biosimilari, la produzione di enzimi ricombinanti (fra cui Taq DNA polimerasi e T7 RNA polimerasi) e la marcatura di proteine/Ab
Tecnologie utilizzate/sviluppate
Il laboratorio dispone di molteplici ceppi batterici e linee cellulari eucariotiche, nonché di una ampia libreria di vettori di espressione per la produzione di proteine e anticorpi ricombinanti. L’efficienza del laboratorio è garantita dall’ impiego di strumenti e tecnologie all’avanguardia, fra cui l’High-Throughput Expression Screening per la rapida individuazione delle condizioni ottimali di espressione, i bioreattori monouso (0,1-20L) per adattare la scala di produzione alle esigenze del cliente, e il sistema di purificazione AKTAxpress (FPLC), con due moduli indipendenti in grado di operare contemporaneamente con più colonne cromatografiche. Per la caratterizzazione di proteine ed anticorpi, il laboratorio si avvale, infine, di analisi mediante ELISA, IF, SPR, HPLC, che si aggiungono alle più comuni metodiche biochimiche (SDS-PAGE e Western Blot).
Servizi offerti
Proteine ed Anticorpi Ricombinanti
- Clonaggio ed espressione di proteine ricombinanti in sistemi procariotici e/o eucariotici.
- Clonaggio ed espressione anticorpi ricombinanti (rAb) in cellule di mammifero.
- Generazione di anticorpi chimerici
- Produzione e purificazione di proteine e anticorpi (dal microgrammo al grammo).
- Caratterizzazione biochimica e funzionale di proteine e anticorpi (HPLC,MS,SPR,DC).
Anticorpi Monoclonali
- Design della strategia di immunizzazione
- Design e produzione dell’antigene
- Immunizzazione (con proteine ricombinanti, peptidi e/o antigeni cellulari)
- Titolazione anticorpale nel siero
- Fusione somatica
- Screening primario degli ibridomi
- Sottoclonaggio degli ibridomi
- Screening secondario
- Stabilizzazione dell’ibridoma/i
- Generazione della banca cellulare
- Purificazione del/imAb (da 10 a 100.000 ug)
- Caratterizzazione (isotipo, mappatura dell’epitopo, SDS-PAGE, WB, ELISA, HPLC, SPR).
TEST ANALITICI ED IMMUNOENZIMATICI PERSONALIZZATI
Portfolio prodotti
- Biosimilari (cloni ricombinanti, vettori di espressione, protocolli di produzione e caratterizzazione)
Insulina
Glargina
Interferone alpha
Interferone beta
- Proteine ricombinanti
PIN1
GDF15
IFNa
IFNb
- Taq ricombinante
- Mycoplasma detection kit